trang_banner

Hiểu biết mới về liệu pháp huyết tương giàu tiểu cầu (PRP) – Phần II

PRP hiện đại: “PRP lâm sàng”

Trong 10 năm qua, phác đồ điều trị PRP đã có những thay đổi lớn.Thông qua nghiên cứu thực nghiệm và lâm sàng, giờ đây chúng ta đã hiểu rõ hơn về tiểu cầu và sinh lý tế bào khác.Ngoài ra, một số đánh giá hệ thống chất lượng cao, phân tích tổng hợp và thử nghiệm ngẫu nhiên có đối chứng đã cho thấy hiệu quả của công nghệ sinh học PRP trong nhiều lĩnh vực y tế, bao gồm da liễu, phẫu thuật tim, phẫu thuật thẩm mỹ, phẫu thuật chỉnh hình, kiểm soát cơn đau, bệnh cột sống và y học thể thao. .

Đặc điểm hiện tại của PRP là nồng độ tiểu cầu tuyệt đối, thay đổi từ định nghĩa ban đầu về PRP (bao gồm nồng độ tiểu cầu cao hơn giá trị cơ bản) đến hơn 1 × 10 6/µ L hoặc gấp khoảng 5 lần nồng độ tiểu cầu tối thiểu trong tiểu cầu từ đường cơ sở.Trong đánh giá sâu rộng của Fadadu et al.33 hệ thống và giao thức PRP đã được đánh giá.Số lượng tiểu cầu của chế phẩm PRP cuối cùng được tạo ra bởi một số hệ thống này thấp hơn so với máu toàn phần.Họ báo cáo rằng hệ số tiểu cầu của PRP tăng thấp tới 0,52 với bộ quay đơn (Selphyl ®).Ngược lại, EmCyte Genesis PurePRPII® xoay kép thì nồng độ tiểu cầu do thiết bị tạo ra là cao nhất (1,6 × 10 6 /µL).

Rõ ràng, phương pháp in vitro và động vật không phải là môi trường nghiên cứu lý tưởng để chuyển đổi thành công sang thực hành lâm sàng.Tương tự, nghiên cứu so sánh thiết bị không ủng hộ quyết định này vì chúng cho thấy nồng độ tiểu cầu giữa các thiết bị PRP rất khác nhau.May mắn thay, thông qua công nghệ và phân tích dựa trên proteomics, chúng ta có thể nâng cao hiểu biết về các chức năng tế bào trong PRP ảnh hưởng đến kết quả điều trị.Trước khi đạt được sự đồng thuận về các chế phẩm và công thức PRP được tiêu chuẩn hóa, PRP nên tuân theo các công thức PRP lâm sàng để thúc đẩy các cơ chế sửa chữa mô đáng kể và kết quả lâm sàng tiến triển.

 

Công thức PRP lâm sàng

Hiện tại, PRP lâm sàng hiệu quả (C-PRP) được đặc trưng là một thành phần phức tạp của các thành phần đa bào tự thân trong huyết tương thể tích nhỏ thu được từ một phần máu ngoại vi sau khi ly tâm.Sau khi ly tâm, PRP và các thành phần tế bào không phải tiểu cầu của nó có thể được thu hồi từ thiết bị cô đặc theo các mật độ tế bào khác nhau (trong đó mật độ tiểu cầu là thấp nhất).

Phòng khám-PRP

Sử dụng thiết bị tách mật độ tế bào PurePRP-SP ® (EmCyte Corporation, Fort Myers, FL, USA) được sử dụng cho máu toàn phần sau hai quy trình ly tâm.Sau quá trình ly tâm đầu tiên, thành phần máu toàn phần được tách thành hai lớp cơ bản là huyền phù huyết tương tiểu cầu (nạc) và lớp hồng cầu.Ở A, bước ly tâm thứ hai đã được hoàn thành.Khối lượng PRP thực tế có thể được trích xuất để sử dụng cho bệnh nhân.Độ phóng đại ở B cho thấy có lớp màu nâu lắng đọng hồng cầu đa thành phần có tổ chức (được biểu thị bằng đường màu xanh) ở dưới cùng của thiết bị, chứa nồng độ cao tiểu cầu, bạch cầu đơn nhân và tế bào lympho, dựa trên độ dốc mật độ.Trong ví dụ này, theo quy trình chuẩn bị C-PRP với lượng bạch cầu trung tính kém, tỷ lệ bạch cầu trung tính tối thiểu (<0,3%) và hồng cầu (<0,1%) sẽ được chiết xuất.

 

Hạt tiểu cầu

Trong ứng dụng PRP lâm sàng ban đầu, hạt α- là cấu trúc bên trong tiểu cầu được nhắc đến nhiều nhất, vì chúng chứa các yếu tố đông máu, một số lượng lớn PDGF và chất điều hòa tạo mạch, nhưng có ít chức năng tạo huyết khối.Các yếu tố khác bao gồm các thành phần chemokine và cytokine ít được biết đến hơn, chẳng hạn như yếu tố tiểu cầu 4 (PF4), protein cơ bản tiền tiểu cầu, P-selectin (một chất kích hoạt integrin) và chemokine RANTES (được điều chỉnh bằng cách kích hoạt, biểu hiện các tế bào T bình thường và có lẽ là tiết ra).Chức năng tổng thể của các thành phần hạt tiểu cầu cụ thể này là tuyển dụng và kích hoạt các tế bào miễn dịch khác hoặc gây viêm tế bào nội mô.

hạt tiểu cầu

 

Các thành phần dạng hạt dày đặc như ADP, serotonin, polyphosphate, histamine và adrenaline được sử dụng rộng rãi hơn như chất điều hòa kích hoạt tiểu cầu và huyết khối.Quan trọng nhất, nhiều yếu tố trong số này có chức năng sửa đổi các tế bào miễn dịch.ADP tiểu cầu được nhận biết bởi thụ thể P2Y12ADP trên tế bào đuôi gai (DC), do đó làm tăng quá trình nội bào của kháng nguyên.DC (tế bào trình diện kháng nguyên) rất quan trọng để bắt đầu phản ứng miễn dịch của tế bào T và kiểm soát phản ứng miễn dịch bảo vệ, liên kết hệ thống miễn dịch bẩm sinh và hệ thống miễn dịch thích nghi.Ngoài ra, adenosine triphosphate (ATP) tiểu cầu gửi tín hiệu qua thụ thể tế bào T P2X7, dẫn đến tăng sự biệt hóa của tế bào trợ giúp T CD4 thành tế bào T trợ giúp 17 (Th17) tiền viêm.Các thành phần hạt đậm đặc tiểu cầu khác (chẳng hạn như glutamate và serotonin) lần lượt gây ra sự di chuyển tế bào T và tăng sự biệt hóa bạch cầu đơn nhân thành DC.Trong PRP, các chất điều hòa miễn dịch có nguồn gốc từ các hạt dày đặc này được làm giàu rất cao và có chức năng miễn dịch đáng kể.

Số lượng tương tác tiềm năng trực tiếp và gián tiếp giữa tiểu cầu và các tế bào (thụ thể) khác là rất lớn.Do đó, việc áp dụng PRP trong môi trường mô bệnh lý tại chỗ có thể gây ra nhiều tác động gây viêm khác nhau.

 

Nồng độ tiểu cầu

C-PRP nên chứa liều lượng lâm sàng của tiểu cầu đậm đặc để tạo ra hiệu quả điều trị có lợi.Tiểu cầu trong C-PRP sẽ kích thích sự tăng sinh tế bào, tổng hợp các yếu tố trung mô và tế bào thần kinh, thúc đẩy sự di chuyển của các tế bào hóa học và kích thích hoạt động điều hòa miễn dịch, như trong hình.nồng độ tiểu cầu

 

Tiểu cầu được kích hoạt, giải phóng PGF và các phân tử bám dính làm trung gian cho nhiều tương tác tế bào: hóa hướng động, bám dính tế bào, di chuyển và biệt hóa tế bào, đồng thời điều chỉnh các hoạt động điều hòa miễn dịch.Những tương tác tế bào-tế bào tiểu cầu này góp phần hình thành mạch và hoạt động viêm, và cuối cùng kích thích quá trình sửa chữa mô.Chữ viết tắt: BMA: hút tủy xương, EPC: tế bào tiền thân nội mô, EC: tế bào nội mô, 5-HT: 5-hydroxytryptamine, RANTES: kích hoạt điều hòa biểu hiện tế bào T bình thường và bài tiết giả định, JAM: loại phân tử bám dính mối nối, CD40L: cụm 40 phối tử, SDF-1 α: Yếu tố có nguồn gốc từ tế bào cơ địa-1 α, CXCL: phối tử chemokine (mô-đun CXC), PF4: yếu tố tiểu cầu 4. Phỏng theo Everts et al.

Marx là người đầu tiên chứng minh rằng quá trình lành vết thương ở xương và mô mềm được tăng cường và số lượng tiểu cầu tối thiểu là 1 × 10 6 /µL。 Những kết quả này đã được xác nhận trong một nghiên cứu về phản ứng tổng hợp vùng thắt lưng qua lỗ liên đốt sống, khi liều tiểu cầu lớn hơn 1,3 × Ở mức 106 tiểu cầu/µL, nghiên cứu này cho thấy sự kết hợp nhiều hơn.Ngoài ra, Giusti và cộng sự.Tiết lộ 1,5 × Cơ chế sửa chữa mô ở liều 109 cần tiểu cầu/mL để tạo ra sự hình thành mạch chức năng thông qua hoạt động của tế bào nội mô.Trong nghiên cứu thứ hai, nồng độ cao hơn làm giảm khả năng hình thành mạch của tiểu cầu trong và xung quanh nang trứng.Ngoài ra, dữ liệu trước đó cho thấy liều PRP cũng sẽ ảnh hưởng đến kết quả điều trị.Do đó, để tạo ra phản ứng hình thành mạch một cách đáng kể và kích thích sự tăng sinh tế bào và di chuyển tế bào, C-PRP phải chứa ít nhất 7,5 trong chai xử lý PRP 5 mL × 10 9 có thể cung cấp tiểu cầu.

Ngoài sự phụ thuộc vào liều lượng, tác dụng của PRP đối với hoạt động của tế bào dường như phụ thuộc nhiều vào thời gian.Sophie và cộng sự.Những kết quả này cho thấy rằng việc tiếp xúc ngắn hạn với chất ly giải tiểu cầu ở người có thể kích thích sự tăng sinh tế bào xương và hóa trị.Ngược lại, tiếp xúc lâu dài với PRP sẽ dẫn đến nồng độ phosphatase kiềm và hình thành khoáng chất thấp hơn.

 

Hồng cầu

Các tế bào hồng cầu chịu trách nhiệm vận chuyển oxy đến các mô và chuyển carbon dioxide từ các mô đến phổi.Chúng không có nhân và bao gồm các phân tử heme liên kết với protein.Các thành phần sắt và heme trong hồng cầu thúc đẩy sự kết hợp giữa oxy và carbon dioxide.Thông thường, vòng đời của hồng cầu là khoảng 120 ngày.Chúng bị đại thực bào loại bỏ khỏi vòng tuần hoàn thông qua một quá trình gọi là lão hóa hồng cầu.Các tế bào hồng cầu trong các mẫu PRP có thể bị hỏng trong điều kiện cắt (ví dụ, phẫu thuật lấy máu toàn phần, quá trình qua trung gian miễn dịch, stress oxy hóa hoặc sơ đồ nồng độ PRP không đủ).Do đó, màng tế bào hồng cầu phân hủy và giải phóng huyết sắc tố độc hại (Hb), được đo bằng huyết sắc tố tự do trong huyết tương (PFH), heme và sắt.].PFH và các sản phẩm thoái hóa của nó (heme và sắt) cùng nhau dẫn đến các tác động có hại và gây độc tế bào trên các mô, dẫn đến stress oxy hóa, mất oxit nitric, kích hoạt các con đường viêm và ức chế miễn dịch.Những tác động này cuối cùng sẽ dẫn đến rối loạn chức năng vi tuần hoàn, co mạch cục bộ và tổn thương mạch máu, cũng như tổn thương mô nghiêm trọng.

Điều quan trọng nhất là khi hồng cầu chứa C-PRP được đưa đến mô, nó sẽ gây ra phản ứng cục bộ gọi là hồng ban, kích hoạt giải phóng một chất ức chế di chuyển đại thực bào và cytokine hiệu quả.Cytokine này ức chế sự di chuyển của bạch cầu đơn nhân và đại thực bào.Nó phát ra các tín hiệu gây viêm mạnh mẽ đến các mô xung quanh, ức chế sự di chuyển của tế bào gốc và tăng sinh nguyên bào sợi, đồng thời dẫn đến rối loạn chức năng tế bào cục bộ đáng kể.Vì vậy, điều quan trọng là hạn chế ô nhiễm RBC trong chế phẩm PRP.Ngoài ra, vai trò của hồng cầu trong việc tái tạo mô chưa bao giờ được xác định.Quá trình ly tâm và chuẩn bị C-PRP thích hợp thường sẽ làm giảm hoặc thậm chí loại bỏ sự hiện diện của hồng cầu, do đó tránh được những hậu quả bất lợi của tình trạng tan máu và đa hồng cầu.

 

Bạch cầu trong C-PRP

Sự hiện diện của bạch cầu trong chế phẩm PRP phụ thuộc vào thiết bị điều trị và sơ đồ chuẩn bị.Trong thiết bị PRP dựa trên huyết tương, bạch cầu bị loại bỏ hoàn toàn;Tuy nhiên, bạch cầu tập trung đáng kể ở chế phẩm PRP lắng đọng lớp hồng cầu màu nâu.Do cơ chế miễn dịch và bảo vệ vật chủ, các tế bào bạch cầu ảnh hưởng lớn đến sinh học bên trong của tình trạng mô cấp tính và mãn tính.Những tính năng này sẽ được thảo luận thêm dưới đây.Do đó, sự hiện diện của bạch cầu cụ thể trong C-PRP có thể gây ra những ảnh hưởng đáng kể đến tế bào và mô.Cụ thể hơn, các hệ thống lớp màu vàng nâu lắng đọng hồng cầu PRP khác nhau sử dụng các sơ đồ chuẩn bị khác nhau, do đó tạo ra tỷ lệ bạch cầu trung tính, tế bào lympho và bạch cầu đơn nhân khác nhau trong PRP.Không thể đo được bạch cầu ái toan và basophils trong chế phẩm PRP vì màng tế bào của chúng quá mỏng manh để chịu được lực xử lý ly tâm.

 

Bạch cầu trung tính

Bạch cầu trung tính là bạch cầu thiết yếu trong nhiều con đường chữa bệnh.Những con đường này kết hợp với các protein kháng khuẩn có trong tiểu cầu để tạo thành một hàng rào dày đặc chống lại các mầm bệnh xâm lấn.Sự tồn tại của bạch cầu trung tính được xác định theo mục tiêu điều trị của C-PRP.Mức độ viêm mô tăng lên có thể được yêu cầu trong liệu pháp sinh học PRP chăm sóc vết thương mãn tính hoặc trong các ứng dụng nhằm mục đích phát triển hoặc chữa lành xương.Điều quan trọng là các chức năng bổ sung của bạch cầu trung tính đã được tìm thấy trong một số mô hình, nhấn mạnh vai trò của chúng trong quá trình tạo mạch và sửa chữa mô.Tuy nhiên, bạch cầu trung tính cũng có thể gây ra tác dụng có hại nên không phù hợp với một số ứng dụng.Chu và Wang đã chứng minh rằng việc sử dụng PRP giàu bạch cầu trung tính có thể dẫn đến sự gia tăng tỷ lệ collagen loại III và collagen loại I, do đó làm trầm trọng thêm tình trạng xơ hóa và giảm sức mạnh của gân.Các đặc điểm có hại khác qua trung gian bạch cầu trung tính là giải phóng các cytokine gây viêm và metallicoproteinase ma trận (MMP), có thể thúc đẩy quá trình viêm và dị hóa khi áp dụng cho các mô.

 

Bạch cầu đơn nhân

Trong C-PRP, tế bào lympho T và B đơn nhân tập trung nhiều hơn bất kỳ tế bào bạch cầu nào khác.Chúng có liên quan chặt chẽ với khả năng miễn dịch thích ứng gây độc tế bào qua trung gian tế bào.Tế bào lympho có thể kích hoạt các phản ứng của tế bào để chống lại nhiễm trùng và thích nghi với những kẻ xâm lược.Ngoài ra, các cytokine có nguồn gốc từ tế bào lympho T (interferon- γ [IFN- γ] Và interleukin-4 (IL-4) tăng cường sự phân cực của đại thực bào. Verassar và cộng sự. Người ta đã chứng minh rằng các tế bào lympho T thông thường có thể gián tiếp thúc đẩy quá trình lành mô ở mô hình chuột bằng cách điều chỉnh sự biệt hóa của bạch cầu đơn nhân và đại thực bào.

 

Monocyte - tế bào sửa chữa đa năng

Tùy theo thiết bị chuẩn bị PRP được sử dụng, bạch cầu đơn nhân có thể nhô ra hoặc không tồn tại trong chai xử lý PRP.Thật không may, hiệu suất và khả năng tái tạo của chúng hiếm khi được thảo luận trong tài liệu.Vì vậy, người ta ít chú ý đến bạch cầu đơn nhân trong phương pháp bào chế hoặc công thức cuối cùng.Nhóm bạch cầu đơn nhân không đồng nhất, có nguồn gốc từ tế bào tiền thân trong tủy xương và được vận chuyển đến các mô ngoại biên thông qua con đường tế bào gốc tạo máu theo kích thích vi môi trường.Trong quá trình cân bằng nội môi và viêm, các bạch cầu đơn nhân tuần hoàn sẽ rời khỏi dòng máu và được tuyển dụng đến các mô bị thương hoặc bị thoái hóa.Chúng có thể hoạt động như các đại thực bào (M Φ) tế bào Effector hoặc tế bào tiền thân.Bạch cầu đơn nhân, đại thực bào và tế bào đuôi gai đại diện cho hệ thống thực bào đơn nhân (MPS).. Một đặc điểm điển hình của MPS là tính linh hoạt của kiểu biểu hiện gen và sự chồng chéo chức năng giữa các loại tế bào này.Trong các mô bị thoái hóa, các đại thực bào thường trú, các yếu tố tăng trưởng hoạt động cục bộ, các cytokine gây viêm, tế bào chết theo chương trình hoặc hoại tử và các sản phẩm vi sinh vật khởi động các tế bào đơn nhân biệt hóa thành các nhóm tế bào MPS.Giả sử khi C-PRP chứa bạch cầu đơn nhân năng suất cao được tiêm vào vi môi trường cục bộ của bệnh, bạch cầu đơn nhân có khả năng biệt hóa thành M Φ để gây ra những thay đổi lớn cho tế bào.

Từ bạch cầu đơn nhân đến M Φ Trong quá trình biến nạp, kiểu hình M Φ cụ thể.Trong mười năm qua, một mô hình tích hợp M Φ đã được phát triển. Cơ chế kích hoạt phức tạp được mô tả là sự phân cực của hai trạng thái đối lập: M Φ Kiểu hình 1 (M Φ 1, Kích hoạt cổ điển) và M Φ Kiểu hình 2 (M Φ 2, kích hoạt thay thế).M Φ 1 được đặc trưng bởi sự tiết ra cytokine gây viêm (IFN- γ) và oxit nitric để tạo ra cơ chế tiêu diệt mầm bệnh hiệu quả.M Φ Kiểu hình cũng tạo ra yếu tố tăng trưởng nội mô mạch máu (VEGF) và yếu tố tăng trưởng nguyên bào sợi (FGF).M Φ Kiểu hình bao gồm các tế bào chống viêm có khả năng thực bào cao.M Φ 2 Sản xuất các thành phần ma trận ngoại bào, tạo mạch và chemokine và interleukin 10 (IL-10).Ngoài khả năng chống lại mầm bệnh, M Φ Nó còn có thể làm giảm viêm và thúc đẩy quá trình sửa chữa mô.Đáng chú ý là M Φ 2 đã được chia thành M Φ 2a, M Φ 2b và M Φ 2 trong ống nghiệm. Nó phụ thuộc vào kích thích.Việc dịch mã in vivo các phân nhóm này rất khó khăn vì mô có thể chứa các nhóm M Φ hỗn hợp.Điều thú vị là, dựa trên các tín hiệu môi trường cục bộ và nồng độ IL-4, M Φ 1 tiền viêm có thể được chuyển đổi để thúc đẩy quá trình sửa chữa M Φ 2。 Từ những dữ liệu này, thật hợp lý khi cho rằng có nồng độ cao các bạch cầu đơn nhân và các chế phẩm M Φ C-PRP có thể góp phần sửa chữa mô tốt hơn vì chúng có khả năng sửa chữa mô chống viêm và truyền tín hiệu tế bào.

 

Định nghĩa nhầm lẫn về phần bạch cầu trong PRP

Sự hiện diện của bạch cầu trong chai điều trị PRP phụ thuộc vào thiết bị chuẩn bị PRP và có thể có sự khác biệt đáng kể.Có nhiều tranh cãi về sự tồn tại của bạch cầu và sự đóng góp của chúng trong các sản phẩm PRP phụ khác nhau (như PRGF, P-PRP, LP-PRP, LR-PRP, P-PRF và L-PRF). các thử nghiệm có đối chứng (bằng chứng cấp 1) và ba nghiên cứu so sánh tiền cứu (bằng chứng cấp 2) liên quan đến 1055 bệnh nhân, chỉ ra rằng LR-PRP và LP-PRP có độ an toàn tương tự nhau.Tác giả kết luận rằng phản ứng bất lợi của PRP có thể không liên quan trực tiếp đến nồng độ bạch cầu.Trong một nghiên cứu khác, LR-PRP không làm thay đổi interleukin gây viêm (IL-1) ở viêm khớp đầu gối β, IL-6, IL-8 và IL-17).Những kết quả này ủng hộ quan điểm rằng vai trò của bạch cầu trong hoạt động sinh học của PRP in vivo có thể đến từ nhiễu xuyên âm giữa tiểu cầu và bạch cầu.Sự tương tác này có thể thúc đẩy quá trình sinh tổng hợp các yếu tố khác (chẳng hạn như lipoxygen), có thể bù đắp hoặc thúc đẩy quá trình thoái lui của tình trạng viêm.Sau khi giải phóng các phân tử gây viêm ban đầu (axit arachidonic, leukotriene và prostaglandin), lipoxygen A4 được giải phóng khỏi tiểu cầu đã hoạt hóa để ngăn chặn sự kích hoạt bạch cầu trung tính.Chính trong môi trường này mà kiểu hình M Φ từ M Φ 1 Chuyển sang M Φ 2。 Ngoài ra, ngày càng có nhiều bằng chứng cho thấy các tế bào đơn nhân tuần hoàn có thể biệt hóa thành nhiều loại tế bào không thực bào do tính đa năng của chúng.

Loại PRP sẽ ảnh hưởng đến nuôi cấy MSC.So với các mẫu PRP hoặc PPP thuần túy, LR-PRP có thể tạo ra sự tăng sinh cao hơn đáng kể của các MSC có nguồn gốc từ tủy xương (BMMSC), với khả năng giải phóng nhanh hơn và hoạt động sinh học PGF tốt hơn.Tất cả những đặc điểm này đều có lợi cho việc bổ sung bạch cầu đơn nhân vào chai điều trị PRP và nhận ra khả năng điều hòa miễn dịch cũng như tiềm năng biệt hóa của chúng.

 

Điều hòa miễn dịch bẩm sinh và thích nghi của PRP

Chức năng sinh lý nổi tiếng nhất của tiểu cầu là kiểm soát chảy máu.Chúng tích tụ tại vị trí tổn thương mô và các mạch máu bị tổn thương.Những sự kiện này được gây ra bởi sự biểu hiện của integrins và selectins kích thích sự kết dính và kết tập tiểu cầu.Lớp nội mô bị tổn thương càng làm trầm trọng thêm quá trình này, collagen và các protein ma trận dưới nội mô khác bị lộ ra sẽ thúc đẩy quá trình kích hoạt sâu của tiểu cầu.Trong những trường hợp này, vai trò quan trọng của sự tương tác giữa yếu tố von Willebrand (vWF) và glycoprotein (GP), đặc biệt là GP-Ib, đã được chứng minh.Sau khi kích hoạt tiểu cầu, tiểu cầu α-, dày đặc, lysosome và hạt T điều hòa quá trình ngoại bào và giải phóng nội dung của chúng ra môi trường ngoại bào.

 

Phân tử kết dính tiểu cầu

Để hiểu rõ hơn về vai trò của PRP trong các mô viêm và tiểu cầu trong phản ứng miễn dịch, chúng ta nên hiểu các thụ thể bề mặt tiểu cầu (integrins) và các phân tử kết dính mối nối (JAM) và các tương tác tế bào khác nhau có thể bắt đầu các quá trình quan trọng trong khả năng miễn dịch bẩm sinh và thích ứng như thế nào.

Integrins là các phân tử bám dính bề mặt tế bào được tìm thấy trong nhiều loại tế bào khác nhau và được biểu hiện với số lượng lớn trên tiểu cầu.Các tích phân bao gồm a5b1, a6b1, a2b1 LFA-2, (GPIa/IIa) và aIIbb3 (GPIIb/IIIa).Thông thường, chúng tồn tại ở trạng thái tĩnh và có ái lực thấp.Sau khi kích hoạt, chúng chuyển sang trạng thái có ái lực liên kết phối tử cao.Các integrins có các chức năng khác nhau trên tiểu cầu và tham gia vào sự tương tác của tiểu cầu với một số loại tế bào bạch cầu, tế bào nội mô và ma trận ngoại bào.Ngoài ra, phức hợp GP-Ib-V-IX được biểu hiện trên màng tiểu cầu và là thụ thể chính để liên kết với von vWF.Sự tương tác này làm trung gian cho sự tiếp xúc ban đầu giữa tiểu cầu và các cấu trúc dưới nội mô bị lộ ra.Phức hợp integrin và GP của tiểu cầu có liên quan đến các quá trình viêm khác nhau và đóng vai trò quan trọng trong việc hình thành phức hợp tiểu cầu-bạch cầu.Cụ thể, integrin aIIbb3 là cần thiết để tạo thành phức hợp ổn định bằng cách kết hợp fibrinogen với thụ thể kháng nguyên đại thực bào 1 (Mac-1) trên bạch cầu trung tính.

Tiểu cầu, bạch cầu trung tính và tế bào nội mô mạch máu biểu hiện các phân tử kết dính tế bào cụ thể, được gọi là selectin.Trong tình trạng viêm, tiểu cầu biểu hiện P-selectin và L-selectin bạch cầu trung tính.Sau khi kích hoạt tiểu cầu, P-selectin có thể liên kết với phối tử PSGL-1 tồn tại trên bạch cầu trung tính và bạch cầu đơn nhân.Ngoài ra, liên kết PSGL-1 bắt đầu phản ứng xếp tầng tín hiệu nội bào, kích hoạt bạch cầu trung tính thông qua bạch cầu trung tính integrin Mac-1 và kháng nguyên liên quan đến chức năng tế bào lympho 1 (LFA-1).Mac-1 được kích hoạt liên kết với GPIb hoặc GPIIb/IIIa trên tiểu cầu thông qua fibrinogen, do đó ổn định sự tương tác giữa bạch cầu trung tính và tiểu cầu.Ngoài ra, LFA-1 được kích hoạt có thể kết hợp với phân tử kết dính giữa tế bào tiểu cầu 2 để ổn định hơn nữa phức hợp bạch cầu trung tính-tiểu cầu nhằm thúc đẩy sự bám dính lâu dài với tế bào.

 

Tiểu cầu và bạch cầu đóng vai trò chính trong các phản ứng miễn dịch bẩm sinh và thích nghi

Cơ thể có thể nhận ra các vật thể lạ và các mô bị tổn thương trong các bệnh cấp tính hoặc mãn tính để bắt đầu phản ứng chữa lành vết thương và quá trình viêm nhiễm.Hệ thống miễn dịch bẩm sinh và thích nghi bảo vệ vật chủ khỏi bị nhiễm trùng và các tế bào bạch cầu đóng vai trò quan trọng trong sự chồng chéo giữa hai hệ thống.Cụ thể, bạch cầu đơn nhân, đại thực bào, bạch cầu trung tính và tế bào tiêu diệt tự nhiên đóng vai trò chính trong hệ thống bẩm sinh, trong khi tế bào lympho và tập hợp con của chúng đóng vai trò tương tự trong hệ thống miễn dịch thích nghi.

Tiểu cầu và bạch cầu

 

Tương tác tiểu cầu và bạch cầu trong tương tác tế bào miễn dịch bẩm sinh.Tiểu cầu tương tác với bạch cầu trung tính và bạch cầu đơn nhân, và cuối cùng là với M Φ Tương tác, điều chỉnh và tăng chức năng tác động của chúng.Những tương tác tiểu cầu-bạch cầu này dẫn đến tình trạng viêm thông qua các cơ chế khác nhau, bao gồm cả NETosis.Chữ viết tắt: MPO: myeloperoxidase, ROS: các loại oxy phản ứng, TF: yếu tố mô, NET: bẫy ngoại bào bạch cầu trung tính, NF- κ B: Yếu tố hạt nhân kappa B, M Φ: Đại thực bào.

 

Hệ thống miễn dịch bẩm sinh

Vai trò của hệ thống miễn dịch bẩm sinh là xác định không đặc hiệu các vi sinh vật xâm lấn hoặc các mảnh mô và kích thích sự thanh lọc của chúng.Khi một số cấu trúc phân tử nhất định được gọi là thụ thể nhận dạng mẫu biểu hiện bề mặt (PRR) kết hợp với các mẫu phân tử liên quan đến mầm bệnh và các mẫu phân tử liên quan đến tổn thương, hệ thống miễn dịch bẩm sinh sẽ được kích hoạt.Có nhiều loại PRR, bao gồm thụ thể giống Toll (TLR) và thụ thể giống RIG-1 (RLR).Những thụ thể này có thể kích hoạt yếu tố phiên mã chính kappa B (NF- κ B). Nó cũng điều chỉnh nhiều khía cạnh của phản ứng miễn dịch bẩm sinh và thích nghi.Điều thú vị là tiểu cầu cũng biểu hiện nhiều loại phân tử thụ thể điều hòa miễn dịch trên bề mặt và tế bào chất của chúng, chẳng hạn như P-selectin, phối tử protein xuyên màng CD40 (CD40L), cytokine (như IL-1 β, TGF- β) và TLR đặc hiệu tiểu cầu. Vì vậy, tiểu cầu có thể tương tác với nhiều tế bào miễn dịch khác nhau.

 

Tương tác bạch cầu-tiểu cầu trong khả năng miễn dịch bẩm sinh

Khi tiểu cầu xâm nhập hoặc xâm nhập vào dòng máu hoặc mô, tiểu cầu là một trong những tế bào phát hiện tổn thương nội mô và mầm bệnh vi khuẩn đầu tiên.Sự kết tập tiểu cầu và thúc đẩy giải phóng các chất chủ vận tiểu cầu ADP, trombin và vWF, dẫn đến hoạt hóa tiểu cầu và biểu hiện các thụ thể chemokine C, CC, CXC và CX3C của tiểu cầu, do đó khiến tiểu cầu ở vị trí nhiễm trùng hoặc bị tổn thương.

Hệ thống miễn dịch bẩm sinh được xác định trước về mặt di truyền để phát hiện những kẻ xâm lược, chẳng hạn như virus, vi khuẩn, ký sinh trùng và chất độc, hoặc các vết thương và vết thương ở mô.Đây là một hệ thống không đặc hiệu, bởi vì bất kỳ mầm bệnh nào cũng sẽ được xác định là ngoại lai hoặc không tự thân và nhanh chóng được xác định.Hệ thống miễn dịch bẩm sinh dựa vào một tập hợp protein và thực bào, giúp nhận biết các đặc điểm được bảo tồn tốt của mầm bệnh và nhanh chóng kích hoạt phản ứng miễn dịch để giúp loại bỏ những kẻ xâm lược, ngay cả khi vật chủ chưa từng tiếp xúc với mầm bệnh cụ thể trước đó.

Bạch cầu trung tính, bạch cầu đơn nhân và tế bào đuôi gai là những tế bào miễn dịch bẩm sinh phổ biến nhất trong máu.Việc tuyển dụng họ là cần thiết để có được phản ứng miễn dịch sớm đầy đủ.Khi PRP được sử dụng trong y học tái tạo, sự tương tác giữa tiểu cầu và bạch cầu sẽ điều chỉnh tình trạng viêm, chữa lành vết thương và sửa chữa mô.TLR-4 trên tiểu cầu kích thích sự tương tác giữa tiểu cầu và bạch cầu trung tính, điều chỉnh cái gọi là vụ nổ oxy hóa bạch cầu bằng cách điều chỉnh sự giải phóng các loại oxy phản ứng (ROS) và myeloperoxidase (MPO) từ bạch cầu trung tính.Ngoài ra, sự tương tác giữa tiểu cầu-bạch cầu trung tính và sự thoái hóa bạch cầu trung tính dẫn đến sự hình thành bẫy bạch cầu trung tính-ngoại bào (NET).NET bao gồm nhân bạch cầu trung tính và các nội dung nội bào bạch cầu trung tính khác, có thể bắt giữ vi khuẩn và tiêu diệt chúng thông qua NETosis.Sự hình thành NET là một cơ chế tiêu diệt thiết yếu của bạch cầu trung tính.

Sau khi kích hoạt tiểu cầu, bạch cầu đơn nhân có thể di chuyển đến các mô bị bệnh và thoái hóa, nơi chúng thực hiện các hoạt động bám dính và tiết ra các phân tử gây viêm có thể làm thay đổi tính chất hóa học và phân giải protein.Ngoài ra, tiểu cầu có thể kích hoạt bạch cầu đơn nhân NF-κB để điều chỉnh chức năng tác động của bạch cầu đơn nhân, là chất trung gian chính của phản ứng viêm, kích hoạt và biệt hóa tế bào miễn dịch.Tiểu cầu tiếp tục thúc đẩy quá trình oxy hóa nội sinh của bạch cầu đơn nhân để thúc đẩy sự tiêu diệt các mầm bệnh thực bào.Sự giải phóng MPO được thực hiện qua trung gian bởi sự tương tác trực tiếp giữa CD40L-MAC-1 tiểu cầu-bạch cầu đơn nhân.Điều thú vị là, khi P-selectin kích hoạt tiểu cầu trong điều kiện mô viêm cấp tính và mãn tính, các chemokine có nguồn gốc từ tiểu cầu PF4, RANTES, IL-1 β và CXCL-12 có thể ngăn ngừa quá trình tự hủy của bạch cầu đơn nhân, nhưng thúc đẩy sự biệt hóa của chúng thành đại thực bào.

 

Hệ thống miễn dịch thích ứng

Sau khi hệ thống miễn dịch bẩm sinh không đặc hiệu nhận ra tổn thương do vi khuẩn hoặc mô, hệ thống miễn dịch thích nghi cụ thể sẽ tiếp quản.Các hệ thống thích ứng bao gồm các tế bào lympho B liên kết với kháng nguyên (tế bào B) và các tế bào lympho T thông thường (Treg) phối hợp thanh thải mầm bệnh.Tế bào T có thể được chia đại khái thành tế bào T trợ giúp (tế bào Th) và tế bào T gây độc tế bào (tế bào Tc, còn được gọi là tế bào T sát thủ).Các tế bào Th được chia tiếp thành các tế bào Th1, Th2 và Th17, có chức năng chính trong quá trình viêm.Tế bào Th có thể tiết ra các cytokine tiền viêm (ví dụ IFN- γ, TNF- β) Và một số interleukin (ví dụ IL-17). Chúng đặc biệt hiệu quả trong việc ngăn ngừa nhiễm virus và vi khuẩn nội bào. Tế bào Th kích thích sự tăng sinh và biệt hóa của các tế bào liên quan đến Tế bào Tc là tế bào tác động, có thể loại bỏ các vi sinh vật và tế bào nội bào và ngoại bào mục tiêu.

Điều thú vị là tế bào Th2 sản xuất IL-4 và ảnh hưởng đến Kiểu hình M Φ, M Φ Tái tạo có hướng dẫn Kiểu hình M Φ 2, trong khi IFN- γ M Φ Thay đổi thành Kiểu hình M Φ 1 viêm, tùy thuộc vào liều lượng và thời gian của cytokine.Sau khi IL-4 được kích hoạt, M Φ 2 khiến tế bào Treg biệt hóa thành tế bào Th2, sau đó tạo ra IL-4 bổ sung (vòng phản hồi tích cực).Tế bào Th chuyển đổi M Φ Kiểu hình hướng tới kiểu hình tái tạo để đáp ứng với các tác nhân sinh học có nguồn gốc mô.Cơ chế này dựa trên bằng chứng cho thấy tế bào Th đóng vai trò quan trọng trong việc kiểm soát tình trạng viêm và sửa chữa mô.

 

Tương tác bạch cầu-tiểu cầu trong miễn dịch thích ứng

Hệ thống miễn dịch thích ứng sử dụng các thụ thể đặc hiệu của kháng nguyên và ghi nhớ các mầm bệnh đã gặp trước đó và tiêu diệt chúng khi gặp vật chủ sau đó.Tuy nhiên, những phản ứng miễn dịch thích ứng này phát triển chậm.Konias và cộng sự.Nó cho thấy thành phần tiểu cầu góp phần nhận thức rủi ro và sửa chữa mô, đồng thời sự tương tác giữa tiểu cầu và bạch cầu thúc đẩy kích hoạt phản ứng miễn dịch thích ứng.

Trong phản ứng miễn dịch thích ứng, tiểu cầu thúc đẩy phản ứng bạch cầu đơn nhân và đại thực bào thông qua sự trưởng thành của tế bào DC và NK, dẫn đến phản ứng tế bào T và tế bào B cụ thể.Do đó, các thành phần hạt tiểu cầu ảnh hưởng trực tiếp đến khả năng miễn dịch thích nghi bằng cách biểu hiện CD40L, một phân tử cần thiết để điều chỉnh phản ứng miễn dịch thích nghi.Tiểu cầu thông qua CD40L không chỉ đóng vai trò trình diện kháng nguyên mà còn ảnh hưởng đến phản ứng của tế bào T.Lưu và cộng sự.Người ta phát hiện ra rằng tiểu cầu điều chỉnh phản ứng của tế bào T CD4 một cách phức tạp.Sự điều hòa khác biệt này của các tập hợp tế bào T CD4 có nghĩa là tiểu cầu thúc đẩy tế bào T CD4 phản ứng với các kích thích viêm, do đó tạo ra các phản ứng kháng viêm và chống viêm mạnh mẽ.

Tiểu cầu cũng điều chỉnh phản ứng thích nghi qua trung gian tế bào B đối với mầm bệnh vi khuẩn.Người ta biết rằng CD40L trên các tế bào T CD4 được kích hoạt sẽ kích hoạt CD40 của tế bào B, cung cấp tín hiệu thứ hai cần thiết để kích hoạt tế bào lympho B phụ thuộc vào tế bào T, chuyển đổi kiểu hình tiếp theo cũng như sự biệt hóa và tăng sinh tế bào B.Nhìn chung, kết quả cho thấy rõ ràng các chức năng khác nhau của tiểu cầu trong khả năng miễn dịch thích nghi, cho thấy tiểu cầu kết nối sự tương tác giữa tế bào T và tế bào B thông qua CD40-CD40L, do đó tăng cường phản ứng của tế bào B phụ thuộc vào tế bào T.Ngoài ra, tiểu cầu rất giàu thụ thể bề mặt tế bào, có thể thúc đẩy kích hoạt tiểu cầu và giải phóng một số lượng lớn các phân tử có hoạt tính sinh học và viêm được lưu trữ trong các hạt tiểu cầu khác nhau, do đó ảnh hưởng đến phản ứng miễn dịch bẩm sinh và thích nghi.

 

Vai trò mở rộng của serotonin có nguồn gốc từ tiểu cầu trong PRP

Serotonin (5-hydroxytryptamine, 5-HT) có vai trò quan trọng rõ ràng trong hệ thần kinh trung ương (CNS), bao gồm cả khả năng chịu đau.Người ta ước tính rằng hầu hết 5-HT ở người được sản xuất ở đường tiêu hóa và sau đó qua tuần hoàn máu, nơi nó được tiểu cầu hấp thụ thông qua chất vận chuyển tái hấp thu serotonin và được lưu trữ dưới dạng hạt dày đặc ở nồng độ cao (65 mmol/L).5-HT là một chất dẫn truyền thần kinh và hormone nổi tiếng giúp điều chỉnh các quá trình tâm lý thần kinh khác nhau trong CNS (trung tâm 5-HT).Tuy nhiên, hầu hết 5-HT tồn tại bên ngoài CNS (5-HT ngoại vi) và nó liên quan đến việc điều chỉnh các chức năng sinh học toàn thân và tế bào của nhiều hệ cơ quan, bao gồm hệ thống chức năng tim mạch, phổi, tiêu hóa, niệu sinh dục và tiểu cầu.5-HT có sự trao đổi chất phụ thuộc vào nồng độ trên nhiều loại tế bào, bao gồm tế bào mỡ, tế bào biểu mô và bạch cầu.5-HT ngoại vi cũng là một bộ điều biến miễn dịch mạnh mẽ, có thể kích thích hoặc ức chế tình trạng viêm và ảnh hưởng đến các tế bào miễn dịch khác nhau thông qua thụ thể 5-HT cụ thể (5HTR).

 

Cơ chế cận tiết và tự tiết của HT

Hoạt động của 5-HT được điều hòa bởi sự tương tác của nó với 5HTR, một siêu họ có bảy thành viên (5-HT 1 – 7) và ít nhất 14 phân nhóm thụ thể khác nhau, bao gồm cả thành viên được phát hiện gần đây là 5-HT 7, ngoại vi và có chức năng quản lý cơn đau.Trong quá trình thoái hóa tiểu cầu, tiểu cầu được kích hoạt sẽ tiết ra một số lượng lớn 5-HT có nguồn gốc từ tiểu cầu, có thể thúc đẩy sự co mạch và kích thích hoạt hóa các tiểu cầu và tế bào lympho lân cận thông qua sự biểu hiện của 5-HTR trên tế bào nội mô, tế bào cơ trơn và tế bào miễn dịch.Pacala và cộng sự.Tác dụng phân bào của 5-HT trên các tế bào nội mô mạch máu đã được nghiên cứu và khả năng thúc đẩy sự phát triển của các mạch máu bị tổn thương bằng cách kích thích hình thành mạch đã được xác định.Cách thức điều hòa các quá trình này vẫn chưa hoàn toàn rõ ràng, nhưng nó có thể liên quan đến các đường dẫn tín hiệu hai chiều khác biệt trong vi mạch mô để điều chỉnh chức năng của tế bào nội mô mạch máu và tế bào cơ trơn, nguyên bào sợi và tế bào miễn dịch thông qua các thụ thể 5-HT cụ thể trên các tế bào này. .Chức năng tự tiết của tiểu cầu 5-HT sau khi kích hoạt tiểu cầu đã được mô tả [REF].Việc giải phóng 5-HT giúp tăng cường kích hoạt tiểu cầu và huy động tiểu cầu lưu thông, dẫn đến kích hoạt các phản ứng xếp tầng tín hiệu và các tác nhân ngược dòng hỗ trợ phản ứng tiểu cầu.

 

Tác dụng điều hòa miễn dịch 5-HT

Ngày càng có nhiều bằng chứng cho thấy serotonin có thể đóng một vai trò trong 5HTR khác nhau như một bộ điều biến miễn dịch.Theo 5HTR được biểu hiện ở nhiều bạch cầu khác nhau liên quan đến phản ứng viêm, 5-HT có nguồn gốc từ tiểu cầu hoạt động như một chất điều hòa miễn dịch trong cả hệ thống miễn dịch bẩm sinh và thích nghi.5-HT có thể kích thích sự tăng sinh Treg và điều chỉnh chức năng của tế bào B, tế bào tiêu diệt tự nhiên và bạch cầu trung tính bằng cách thu hút DC và bạch cầu đơn nhân đến vị trí viêm.Các nghiên cứu gần đây đã chỉ ra rằng 5-HT có nguồn gốc từ tiểu cầu có thể điều chỉnh chức năng của các tế bào miễn dịch trong những điều kiện cụ thể.Do đó, sử dụng C-PRP, nồng độ tiểu cầu lớn hơn 1 × 10 6/µ L có thể giúp vận chuyển đáng kể nồng độ 5-HT có nguồn gốc từ tiểu cầu lớn đến mô.Trong môi trường vi mô được đặc trưng bởi các thành phần gây viêm, PRP có thể tương tác với một số tế bào miễn dịch đóng vai trò chính trong các bệnh lý này, điều này có thể ảnh hưởng đến kết quả lâm sàng.

Hiệu ứng điều hòa miễn dịch-5-HT

Hình hiển thị phản ứng 5-HT nhiều mặt sau khi kích hoạt tiểu cầu PRP bị viêm.Sau khi kích hoạt tiểu cầu, tiểu cầu giải phóng các hạt của chúng, bao gồm 5-HT ở dạng hạt dày đặc, có nhiều tác dụng khác biệt đối với các tế bào miễn dịch, tế bào nội mô và tế bào cơ trơn khác nhau.Chữ viết tắt: SMC: tế bào cơ trơn, EC: tế bào nội mô, Treg: tế bào lympho T thông thường, M Φ: Đại thực bào, DC: tế bào đuôi gai, IL: interleukin, IFN- γ: Interferon γ。 Được sửa đổi và điều chỉnh từ Everts et al.và Hull và cộng sự.

 

Tác dụng giảm đau của PRP

Tiểu cầu được kích hoạt sẽ giải phóng nhiều chất trung gian gây viêm và chống viêm, không chỉ gây đau mà còn làm giảm viêm và đau.Sau khi được áp dụng, động lực tiểu cầu điển hình của PRP sẽ thay đổi môi trường vi mô trước khi sửa chữa và tái tạo mô thông qua nhiều con đường phức tạp liên quan đến quá trình đồng hóa và dị hóa, tăng sinh tế bào, biệt hóa và điều hòa tế bào gốc.Những đặc điểm này của PRP dẫn đến việc ứng dụng PRP trong các tình trạng bệnh lý lâm sàng khác nhau thường liên quan đến đau mãn tính (như chấn thương thể thao, bệnh chỉnh hình, bệnh cột sống và vết thương mãn tính phức tạp), mặc dù cơ chế chính xác vẫn chưa được xác định đầy đủ.

Năm 2008, Evertz và cộng sự.Đây là thử nghiệm ngẫu nhiên có đối chứng đầu tiên báo cáo tác dụng giảm đau của chế phẩm PRP, được điều chế từ lớp màu nâu của tốc độ lắng hồng cầu tự thân và được kích hoạt bằng trombin tự thân sau phẫu thuật vai.Họ ghi nhận sự giảm đáng kể về điểm số trên thang điểm tương tự trực quan, việc sử dụng thuốc giảm đau dựa trên opioid và phục hồi chức năng sau phẫu thuật thành công hơn.Điều đáng chú ý là chúng phản ánh tác dụng giảm đau của tiểu cầu được kích hoạt và suy đoán cơ chế tiểu cầu giải phóng 5-HT.Nói tóm lại, tiểu cầu không hoạt động trong PRP mới được chuẩn bị.Sau khi được kích hoạt trực tiếp hoặc gián tiếp (yếu tố mô), tiểu cầu sẽ thay đổi hình dạng và sản xuất đủ giả để thúc đẩy quá trình kết tập tiểu cầu.Sau đó, chúng giải phóng các hạt α- Và dày đặc nội bào.Các mô được điều trị bằng PRP hoạt hóa sẽ bị PGF, cytokine và các lysosome tiểu cầu khác xâm chiếm.Cụ thể hơn, khi các hạt dày đặc giải phóng nội dung của chúng, chúng sẽ giải phóng một lượng lớn 5-HT có tác dụng điều chỉnh cơn đau.Trong C-PRP, nồng độ tiểu cầu cao gấp 5 đến 7 lần so với máu ngoại vi.Vì vậy, việc giải phóng 5-HT từ tiểu cầu là điều vô cùng quan trọng.Điều thú vị là Sprott và cộng sự.Báo cáo quan sát thấy cơn đau giảm đáng kể sau khi châm cứu và châm cứu, nồng độ 5-HT có nguồn gốc từ tiểu cầu giảm đáng kể và sau đó nồng độ 5-HT trong huyết tương tăng lên.

Ở ngoại vi, tiểu cầu, tế bào mast và tế bào nội mô sẽ giải phóng 5-HT nội sinh trong quá trình tổn thương mô hoặc chấn thương phẫu thuật.Điều thú vị là, nhiều loại thụ thể 5-HT của tế bào thần kinh đã được phát hiện ở khu vực ngoại vi, điều này xác nhận rằng 5-HT có thể cản trở quá trình truyền cảm thụ đau ở khu vực ngoại vi.Các nghiên cứu này cho thấy 5-HT có thể ảnh hưởng đến quá trình truyền cảm thụ đau của các mô ngoại biên thông qua các thụ thể 5-HT1, 5-HT2, 5-HT3, 5-HT4 và 5-HT7.

Hệ thống 5-HT đại diện cho một hệ thống mạnh mẽ có thể giảm và tăng mức độ đau sau khi bị kích thích có hại.Sự điều hòa trung tâm và ngoại vi của các tín hiệu cảm thụ đau và những thay đổi trong hệ thống 5-HT đã được báo cáo ở những bệnh nhân bị đau mãn tính.Trong những năm gần đây, một số lượng lớn nghiên cứu đã tập trung vào vai trò của 5-HT và các thụ thể tương ứng của nó trong việc xử lý và điều chỉnh thông tin có hại, từ đó tạo ra các loại thuốc như thuốc ức chế tái hấp thu serotonin có chọn lọc (SSRI).Thuốc này ức chế sự tái hấp thu serotonin vào tế bào thần kinh tiền synap sau khi giải phóng serotonin.Nó ảnh hưởng đến thời gian và cường độ truyền serotonin và là phương pháp điều trị thay thế cho cơn đau mãn tính.Cần nghiên cứu lâm sàng sâu hơn để hiểu rõ cơ chế phân tử điều chỉnh cơn đau 5-HT có nguồn gốc từ PRP trong các bệnh mãn tính và thoái hóa.

Dữ liệu khác để giải quyết tác dụng giảm đau tiềm tàng của PRP có thể thu được sau khi thử nghiệm trên mô hình động vật giảm đau.Các kết luận thống kê so sánh trong các mô hình này gặp nhiều thách thức vì những nghiên cứu này chứa quá nhiều biến số.Tuy nhiên, một số nghiên cứu lâm sàng đã đề cập đến tác dụng giảm đau và giảm đau của PRP.Một số nghiên cứu đã chỉ ra rằng những bệnh nhân được điều trị chứng viêm gân hoặc rách chóp xoay ít giảm đau.Ngược lại, một số nghiên cứu khác lại chỉ ra rằng PRP có thể làm giảm hoặc thậm chí loại bỏ cơn đau của bệnh nhân bị thoái hóa gân, viêm khớp, viêm cân gan chân và các bệnh về bàn chân, mắt cá chân khác.Nồng độ tiểu cầu cuối cùng và thành phần tế bào sinh học đã được xác định là đặc điểm chính của PRP, giúp quan sát tác dụng giảm đau nhất quán sau khi áp dụng PRP.Các biến số khác bao gồm phương pháp phân phối PRP, công nghệ ứng dụng, quy trình kích hoạt tiểu cầu, mức độ hoạt động sinh học của PGF và cytokine được giải phóng, loại mô áp dụng PRP và loại tổn thương.

Đáng chú ý là Kuffler đã giải quyết được tiềm năng của PRP trong việc giảm đau ở những bệnh nhân bị đau thần kinh mãn tính từ nhẹ đến nặng, thứ phát do dây thần kinh không tái tạo bị tổn thương.Mục đích của nghiên cứu này là để điều tra xem liệu cơn đau thần kinh có thể giảm hoặc giảm bớt do PRP thúc đẩy quá trình tái tạo sợi trục và tái phân bố dây thần kinh mục tiêu hay không.Đáng ngạc nhiên là trong số những bệnh nhân được điều trị, cơn đau thần kinh vẫn được loại bỏ hoặc giảm bớt ít nhất sáu năm sau phẫu thuật.Ngoài ra, tất cả bệnh nhân bắt đầu giảm đau trong vòng ba tuần sau khi áp dụng PRP.

Gần đây, tác dụng giảm đau tương tự của PRP đã được quan sát thấy trong lĩnh vực chăm sóc vết thương và da sau phẫu thuật.Điều thú vị là các tác giả đã báo cáo các khía cạnh sinh lý của cơn đau vết thương liên quan đến tổn thương mạch máu và tình trạng thiếu oxy ở mô da.Họ cũng thảo luận về tầm quan trọng của quá trình tạo mạch trong việc tối ưu hóa quá trình oxy hóa và cung cấp chất dinh dưỡng.Nghiên cứu của họ cho thấy so với nhóm đối chứng, bệnh nhân được điều trị PRP ít đau hơn và tăng sinh mạch đáng kể.Cuối cùng, Johal và các đồng nghiệp của ông đã tiến hành đánh giá hệ thống và phân tích tổng hợp và kết luận rằng PRP có thể giảm đau sau khi sử dụng PRP trong các chỉ định chỉnh hình, đặc biệt ở những bệnh nhân đang điều trị viêm mỏm lồi cầu ngoài và điều trị viêm khớp gối.Thật không may, nghiên cứu này không chỉ rõ tác động của bạch cầu, nồng độ tiểu cầu hoặc việc sử dụng các chất kích hoạt tiểu cầu ngoại sinh, vì những biến số này sẽ ảnh hưởng đến hiệu quả tổng thể của PRP.Nồng độ tiểu cầu PRP tối ưu để giảm đau tối đa là không rõ ràng.Trong mô hình chuột bị viêm gân, nồng độ tiểu cầu là 1,0 × 10 6 / μ Ở L, cơn đau có thể thuyên giảm hoàn toàn, trong khi tác dụng giảm đau do PRP với một nửa nồng độ tiểu cầu giảm đáng kể.Do đó, chúng tôi khuyến khích nhiều nghiên cứu lâm sàng hơn để điều tra tác dụng giảm đau của các chế phẩm PRP khác nhau.

 

PRP và tác dụng tạo mạch

Các chế phẩm C-PRP trong y học tái tạo chính xác cho phép phân phối các phân tử sinh học được giải phóng nhờ nồng độ tiểu cầu cao được kích hoạt tại các vị trí mô đích.Do đó, một loạt các phản ứng tầng đã được bắt đầu, góp phần điều hòa miễn dịch tại chỗ, quá trình viêm và hình thành mạch để thúc đẩy quá trình chữa lành và sửa chữa mô.

Sự hình thành mạch là một quá trình gồm nhiều bước năng động liên quan đến sự nảy mầm và các vi mạch mô từ các mạch máu có sẵn.Sự hình thành mạch đã tiến triển do nhiều cơ chế sinh học khác nhau, bao gồm sự di chuyển tế bào nội mô, tăng sinh, biệt hóa và phân chia.Các quá trình tế bào này là điều kiện tiên quyết cho sự hình thành các mạch máu mới.Chúng rất cần thiết cho sự phát triển của các mạch máu hiện có để khôi phục lưu lượng máu và hỗ trợ hoạt động trao đổi chất cao trong việc sửa chữa mô và tái tạo mô.Những mạch máu mới này cho phép cung cấp oxy và chất dinh dưỡng cũng như loại bỏ các sản phẩm phụ khỏi các mô được điều trị.

Hoạt động tạo mạch được điều hòa bằng cách kích thích yếu tố tạo mạch VEGF và các yếu tố chống tạo mạch (ví dụ, angiostatin và Thrombospondin-1 [TSP-1]).Trong môi trường vi mô bị bệnh và suy thoái (bao gồm căng thẳng oxy thấp, pH thấp và nồng độ axit lactic cao), các yếu tố tạo mạch cục bộ sẽ khôi phục hoạt động tạo mạch.

Một số môi trường hòa tan tiểu cầu, chẳng hạn như FGF cơ bản và TGF-β và VEGF có thể kích thích các tế bào nội mô tạo ra các mạch máu mới.Landsdown và Fortier đã báo cáo nhiều kết quả khác nhau liên quan đến thành phần PRP, bao gồm cả nguồn nội tiểu cầu của nhiều chất điều hòa tạo mạch.Ngoài ra, họ kết luận rằng sự gia tăng hình thành mạch góp phần chữa lành bệnh MSK ở những khu vực có lượng mạch máu kém, chẳng hạn như rách sụn chêm, chấn thương gân và các khu vực khác có lượng mạch máu kém.

 

Thúc đẩy và đặc tính chống tạo mạch của tiểu cầu

Trong vài thập kỷ qua, các nghiên cứu được công bố đã chứng minh rằng tiểu cầu đóng vai trò quan trọng trong quá trình cầm máu ban đầu, hình thành cục máu đông, yếu tố tăng trưởng và giải phóng cytokine cũng như điều hòa sự hình thành mạch như một phần của quá trình sửa chữa mô.Nghịch lý thay, PRP α- Các hạt chứa một kho các yếu tố tăng trưởng tạo mạch, protein chống tạo mạch và các cytokine (như PF4, chất ức chế hoạt hóa plasminogen-1 và TSP-1), và nhắm mục tiêu giải phóng các yếu tố cụ thể có vai trò .Vai trò trong sự hình thành mạch.Do đó, vai trò của PRP trong việc kiểm soát sự điều hòa hình thành mạch có thể được xác định bằng cách kích hoạt các thụ thể bề mặt tế bào cụ thể, TGF- β Bắt đầu các phản ứng tạo mạch và chống tạo mạch.Khả năng của tiểu cầu thực hiện con đường tạo mạch đã được xác nhận trong quá trình tạo mạch bệnh lý và sự hình thành mạch khối u.

Yếu tố tăng trưởng tạo mạch có nguồn gốc từ tiểu cầu và yếu tố tăng trưởng chống tạo mạch, có nguồn gốc từ α- Và các phân tử dày đặc và kết dính.Quan trọng nhất, người ta thường chấp nhận rằng tác dụng tổng thể của tiểu cầu đối với sự hình thành mạch là hỗ trợ tạo mạch và kích thích.Người ta hy vọng rằng liệu pháp PRP sẽ kiểm soát việc tạo mạch, điều này sẽ góp phần mang lại hiệu quả điều trị cho nhiều bệnh, chẳng hạn như chữa lành vết thương và sửa chữa mô.Việc sử dụng PRP, cụ thể hơn là sử dụng PGF nồng độ cao và các cytokine tiểu cầu khác, có thể tạo ra sự hình thành mạch, hình thành mạch và hình thành động mạch, bởi vì yếu tố có nguồn gốc từ tế bào mô đệm 1a liên kết với thụ thể CXCR4 trên các tế bào tiền thân nội mô.Bill và cộng sự.Có ý kiến ​​​​cho rằng PRP làm tăng quá trình tân mạch do thiếu máu cục bộ, có thể là do kích thích hình thành mạch, hình thành mạch và hình thành động mạch.Trong mô hình in vitro của họ, sự tăng sinh tế bào nội mô và sự hình thành mao mạch được gây ra bởi một số lượng lớn các PDG khác nhau, trong đó VEGF là chất kích thích tạo mạch chính.Một yếu tố quan trọng và cần thiết khác để khôi phục con đường hình thành mạch là sự phối hợp giữa nhiều PGF.Richardson và cộng sự.Người ta đã chứng minh rằng hoạt động hiệp đồng của yếu tố tạo mạch có nguồn gốc từ tiểu cầu-bb (PDGF-BB) và VEGF đã dẫn đến sự hình thành nhanh chóng mạng lưới mạch máu trưởng thành so với hoạt động của từng yếu tố tăng trưởng riêng lẻ.Tác động kết hợp của những yếu tố này gần đây đã được xác nhận trong một nghiên cứu về việc tăng cường tuần hoàn bàng hệ não ở chuột bị giảm tưới máu trong thời gian dài.

Quan trọng nhất, một nghiên cứu in vitro đã đo lường tác động tăng sinh của tế bào nội mô tĩnh mạch rốn của con người và nồng độ tiểu cầu khác nhau trong việc lựa chọn thiết bị chuẩn bị PRP và chiến lược liều lượng tiểu cầu, và kết quả cho thấy liều tiểu cầu tối ưu là 1,5 × 106 tiểu cầu/μ 50. Để thúc đẩy sự hình thành mạch.Nồng độ tiểu cầu quá cao có thể ức chế quá trình tạo mạch nên hiệu quả kém.

 

Lão hóa tế bào, lão hóa và PRP

Sự lão hóa của tế bào có thể được gây ra bởi các kích thích khác nhau.Đây là một quá trình trong đó các tế bào ngừng phân chia và trải qua những thay đổi về kiểu hình duy nhất để ngăn chặn sự phát triển không hạn chế của các tế bào bị tổn thương, đóng vai trò quan trọng trong việc ngăn ngừa ung thư.Trong quá trình lão hóa sinh lý, quá trình lão hóa sao chép tế bào cũng sẽ thúc đẩy quá trình lão hóa tế bào và khả năng tái tạo của MSC sẽ giảm đi.

 

Ảnh hưởng của lão hóa và lão hóa tế bào

In vivo, nhiều loại tế bào sẽ già đi và tích tụ trong các mô khác nhau trong quá trình lão hóa, trong đó có một số lượng lớn các tế bào lão hóa.Sự tích tụ của các tế bào lão hóa dường như tăng lên cùng với sự gia tăng của tuổi tác, tổn thương hệ thống miễn dịch, tổn thương mô hoặc các yếu tố liên quan đến căng thẳng.Cơ chế lão hóa tế bào được xác định là yếu tố gây ra các bệnh liên quan đến tuổi tác như viêm xương khớp, loãng xương và thoái hóa đĩa đệm.Một loạt các kích thích sẽ làm trầm trọng thêm quá trình lão hóa tế bào.Đáp lại, kiểu hình bài tiết liên quan đến tuổi già (SASP) sẽ tiết ra nồng độ cao các tế bào protein và cytokine.Kiểu hình đặc biệt này có liên quan đến các tế bào lão hóa, trong đó chúng tiết ra hàm lượng cao các cytokine gây viêm (như IL-1, IL-6, IL-8), các yếu tố tăng trưởng (như TGF-β、 HGF, VEGF, PDGF), MMP và cathepsin.So với người trẻ, SAPS đã được chứng minh là tăng theo tuổi tác, do quá trình ở trạng thái ổn định bị phá hủy dẫn đến lão hóa tế bào và giảm khả năng tái tạo.Cụ thể là các bệnh về khớp và bệnh về cơ xương.Về vấn đề này, lão hóa miễn dịch được coi là một sự thay đổi đáng kể trong phổ bài tiết của các tế bào miễn dịch, cho thấy nồng độ TNF-a, IL-6 và/hoặc Il-1b tăng lên, dẫn đến tình trạng viêm mãn tính ở mức độ thấp.Điều đáng chú ý là rối loạn chức năng tế bào gốc còn liên quan đến các cơ chế tự chủ phi tế bào, chẳng hạn như tế bào lão hóa, đặc biệt là việc sản xuất các yếu tố gây viêm và chống tái tạo thông qua SASP.

Ngược lại, SASP còn có thể kích thích tính dẻo của tế bào và tái lập trình các tế bào lân cận.Ngoài ra, SASP có thể tổ chức liên lạc với các chất trung gian miễn dịch khác nhau và kích hoạt các tế bào miễn dịch để thúc đẩy quá trình thanh lọc các tế bào lão hóa.Hiểu được vai trò và chức năng của các tế bào lão hóa sẽ góp phần chữa lành và tái tạo mô của cơ MSK và các vết thương mãn tính.

Đáng chú ý là Ritcka et al.Một nghiên cứu sâu rộng đã được thực hiện và vai trò chính và có lợi của SASP trong việc thúc đẩy độ dẻo của tế bào và tái tạo mô đã được phát hiện, đồng thời khái niệm cung cấp điều trị tạm thời cho các tế bào lão hóa đã được đưa ra.Họ thận trọng đề cập rằng lão hóa chủ yếu là một quá trình có lợi và tái tạo.

 

Lão hóa tế bào và tiềm năng của PRP

Khi số lượng tế bào gốc giảm đi, quá trình lão hóa sẽ ảnh hưởng đến hoạt động của tế bào gốc.Tương tự, ở người, các đặc điểm của tế bào gốc (như khô, tăng sinh và biệt hóa) cũng giảm theo tuổi tác.Wang và Nirmala báo cáo rằng lão hóa sẽ làm giảm các đặc tính của tế bào gốc tế bào gân và số lượng thụ thể yếu tố tăng trưởng.Một nghiên cứu trên động vật cho thấy nồng độ PDGF ở ngựa non rất cao.Họ kết luận rằng sự gia tăng số lượng thụ thể GF và số lượng GF ở người trẻ có thể có phản ứng tế bào tốt hơn với điều trị PRP so với người lớn tuổi ở người trẻ.Những phát hiện này tiết lộ lý do tại sao điều trị PRP có thể kém hiệu quả hơn hoặc thậm chí không hiệu quả ở những bệnh nhân cao tuổi có ít tế bào gốc hơn và “chất lượng kém”.Người ta đã chứng minh rằng quá trình lão hóa của sụn lão hóa bị đảo ngược và thời gian nghỉ ngơi của tế bào sụn tăng lên sau khi tiêm PRP.Gia và cộng sự.Nó được sử dụng để nghiên cứu quá trình quang hóa nguyên bào sợi ở da chuột trong ống nghiệm, có và không có điều trị PRP, để làm rõ cơ chế phản ứng PGF trong mô hình này.Nhóm PRP cho thấy tác dụng trực tiếp lên ma trận ngoại bào, tăng collagen loại I và giảm tổng hợp metallicoproteinase, cho thấy PRP có thể chống lại sự lão hóa tế bào và cả bệnh thoái hóa MSK.

Trong một nghiên cứu khác, PRP được sử dụng để thu thập tế bào gốc tủy xương già từ những con chuột già.Người ta đã xác định rằng PRP có thể phục hồi nhiều chức năng khác nhau của tế bào gốc khỏi quá trình lão hóa, chẳng hạn như sự tăng sinh tế bào và hình thành khuẩn lạc, đồng thời tái tạo lại các dấu hiệu liên quan đến lão hóa tế bào.

Gần đây, Oberlohr và các đồng nghiệp của ông đã nghiên cứu rộng rãi vai trò của lão hóa tế bào trong việc làm suy yếu quá trình tái tạo cơ và đánh giá PRP và huyết tương nghèo tiểu cầu (PPP) là các lựa chọn điều trị sinh học để phục hồi cơ xương.Họ hình dung rằng phương pháp điều trị PRP hoặc PPP để sửa chữa cơ xương sẽ dựa trên các yếu tố sinh học được tùy chỉnh cho các dấu hiệu tế bào cụ thể của SASP và các yếu tố khác dẫn đến sự phát triển xơ hóa.

Thật hợp lý khi tin rằng trước khi áp dụng PRP, quá trình lão hóa tế bào mục tiêu có thể cải thiện các đặc tính tái tạo của hiệu quả xử lý sinh học bằng cách giảm các yếu tố SASP cục bộ.Người ta đã đề xuất rằng một lựa chọn khác để cải thiện kết quả điều trị PRP và PPP trong tái tạo cơ xương là loại bỏ có chọn lọc các tế bào lão hóa bằng chất thải lão hóa.Không còn nghi ngờ gì nữa, các kết quả nghiên cứu gần đây về tác dụng của PRP đối với quá trình lão hóa và lão hóa tế bào rất hấp dẫn, nhưng chúng vẫn đang ở giai đoạn đầu.Vì vậy, việc đưa ra bất kỳ đề xuất nào vào thời điểm này là không hợp lý.

 

 

 

 

(Nội dung của bài viết này được in lại và chúng tôi không đưa ra bất kỳ đảm bảo rõ ràng hay ngụ ý nào về tính chính xác, độ tin cậy hoặc tính đầy đủ của nội dung trong bài viết này và không chịu trách nhiệm về ý kiến ​​​​của bài viết này, vui lòng hiểu.)


Thời gian đăng: Mar-01-2023